Calcein-AM 是一种特殊的细胞可透性非荧光化合物。其分子结构包含可被细胞内酯酶识别的酯键以及 AM 基团。当 Calcein-AM 与活细胞接触时，由于其具有细胞可透性，能够顺利进入细胞内部。细胞内存在的酯酶发挥关键作用，它们迅速作用于 Calcein-AM 的酯键，通过水解反应将 AM 基团去除。这一过程的产物是 Calcein 分子，Calcein 属于极性分子，具有强绿色荧光特性。由于其极性特征，Calcein 不能像非极性分子那样自由穿透细胞膜。因此，生成的 Calcein 被有效滞留在细胞内，持续发出稳定的绿色荧光。凭借这一特性，可以利用 Calcein-AM 对活细胞进行特异性染色。在细胞生物学实验中，通过观察细胞发出的绿色荧光，便能清晰地分辨活细胞，追踪细胞的生长、迁移等生理活动，为深入探究细胞行为和功能提供有力工具。