实验中什么情况需要进行无菌处理及怎么处理
瑞禧生物2025-03-17   作者:wff   来源:
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在实验中,无菌处理是至关重要的步骤,它旨在防止微生物的污染,确保实验结果的准确性和可靠性。无菌处理主要包括消Poison 和灭菌两个方面,以下是详细的解释和操作步骤:

 

消Poison :指消除或杀灭环境中的病原菌和有害微生物的营养体,但不一定能杀死所有的微生物,特别是抵抗力强的bacteria芽孢等。

灭菌:指杀灭一切微生物的营养体、芽孢和孢子,确保被处理物品上无任何形式的微生物存活。

 

常用的消Poison 与灭菌方法

1. 物理方法

加热法:

干热灭菌:利用高温干燥环境使微生物的蛋白质变性、酶失活,从而达到灭菌的目的。常用于玻璃器皿、金属工具等耐热物品的灭菌。

湿热灭菌:利用饱和蒸汽的高温和高湿度环境,使微生物的蛋白质变性、细胞膜破裂,从而达到灭菌的目的。包括高压蒸汽灭菌(如0.1MPa,121℃,15~30分钟)和常压蒸汽灭菌(如100℃,30分钟,连续3天)等。

过滤除菌:利用微孔滤膜等过滤介质,将微生物从液体或气体中过滤掉,达到无菌的目的。常用于血清、抗生素、糖溶液等热敏性物质的除菌。

辐射灭菌:利用紫外线、γ射线等辐射能量,破坏微生物的DNA结构,从而达到灭菌的目的。常用于玻璃制品、金属制品、橡胶和塑料等物品的灭菌。

超声波杀菌:利用超声波在液体中产生的空化效应、机械效应和热效应,破坏微生物的细胞结构,从而达到杀菌的目的。

高压电场脉冲杀菌:利用高压电场脉冲产生的瞬间高压和强电流,破坏微生物的细胞膜和细胞壁,从而达到杀菌的目的。

2. 化学方法

化学消Poison 剂:利用化学消Poison 剂(如重金属离子、卤素类化合物、过氧化物类化合物等)的氧化、还原、烷基化、酸化等作用,破坏微生物的细胞结构和代谢过程,从而达到消Poison 或灭菌的目的。

 

无菌操作的步骤

空气净化:在实验前,应开启空气净化设备,消除空气中的微生物。

消Poison 操作台面:使用适宜的消Poison 剂对操作台面进行消Poison 处理,确保操作台面的无菌状态。

打火工具灭菌:使用酒精灯或灭菌灯对打火工具(如接种环、接种针等)进行灭菌处理,确保其在操作过程中的无菌状态。

消Poison 液处理:在无菌操作台面上使用消Poison 液擦拭,保持操作区域的无菌状态。

过手消Poison :操作者应进行彻底的手部消Poison ,并戴好无菌手套,避免手部微生物对实验造成污染。

灭菌培养皿:将培养皿放入高温蒸汽灭菌器中进行灭菌处理,确保培养皿的无菌状态。

灭菌物品转移:将灭菌过的物品转移到无菌操作台面上,避免在转移过程中受到污染。

无菌接种:使用无菌技术将植物或菌种接种到无菌培养基上,确保接种过程中的无菌状态。

 

注意事项

在无菌操作过程中,应保持操作空间的封闭性,避免微生物的侵入。

操作人员应穿戴整洁的实验服和口罩,避免自身微生物对实验造成污染。

无菌操作应在酒精灯火焰附近进行,利用火焰的高温杀灭空气中的微生物。

避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触,防止再次污染。 

实验无菌处理