DBCO：二苯并环辛炔，一类点击化学标记试剂，含有活泼的DBCO基团。可以通过无铜点击化学与叠氮化物标记的分子或生物分子发生反应，具有良好的选择性和生物相容性。DBCO试剂在水溶液中具有快速反应性和稳定性，可用于标记叠氮化合物修饰的生物分子，具有较高的特异性和反应活性。DBCO在生物正交标记技术用于追踪生物分子代谢途径中发挥着关键作用，主要包括以下几个方面：

1. 特异性连接：DBCO 能与叠氮基团发生、特异性的无铜点击反应，即应变促进的 1,3 - 偶极环加成反应。在追踪生物分子代谢途径时，先通过细胞的天然代谢过程，将含有叠氮基团的非天然生物分子类似物引入到目标生物分子中。然后，DBCO 修饰的探针或标记物就能选择性地与这些含有叠氮基团的生物分子结合，形成稳定的共价连接，从而实现对目标生物分子的特异性标记。

2. 生物相容性好：DBCO 参与的点击反应条件温和，通常在生理条件下就能进行，对生物分子的活性和生物体系的干扰极小。这使得在不破坏生物分子的功能和生物系统正常生理活动的前提下，能够对生物分子的代谢途径进行追踪。比如在活细胞或体内环境中，DBCO 与叠氮化物的反应可以在水相、近中性 pH 等温和条件下快速发生，不会对细胞的生存、代谢以及生物分子的折叠、定位和相互作用等产生明显影响，从而可以实时、原位地追踪生物分子在细胞内或生物体内的代谢动态。

3. 实现可视化追踪：DBCO 可以与各种功能性的报告基团或成像探针相连，如荧光染料、放射性核素、生物素等。当 DBCO 与含有叠氮基团的生物分子结合后，这些报告基团就能发挥其功能，用于对生物分子进行可视化检测或定量分析，进而追踪生物分子的代谢途径。

4. 多标记和多重成像：由于 DBCO 与叠氮的反应具有高度特异性和正交性，即它不与生物体内的其他天然官能团发生反应，因此可以在同一个生物体系中同时使用多种不同的 DBCO 标记物和叠氮标记的生物分子，实现对多个生物分子或同一生物分子的不同代谢阶段进行多标记和多重成像。